Obiettivi formativi del corso
La Biologia Molecolare Clinica tratta la struttura, le proprietà e le funzioni degli acidi nucleici e più in particolare delle mutazioni e delle loro conseguenze sulla funzione delle proteine in rapporto alle malattie umane. Sono scopo del corso inoltre i metodi per l'individuazione dei geni deficitari e vengono presentati gli aspetti clinici della Biologia Molecolare in relazione alla diagnosi prenatale precoce, alle patologie mitocondriali e alla identificazione di agenti infettanti.

Programma
- Principi dell'analisi genotipica. Il materiale biologico e le tecniche generali di biologia molecolare. Isolamento e analisi degli acidi nucleici (enzimi di restrizione, elettroforesi, Southern e Northern blot, PCR). Preparazione di sonde geniche (vettori di clonaggio, genoteche, marcatura di sonde, oligonucleotidi). Ibridazione in situ.


- I polimorfismi del DNA. Polimorfismi di restrizione (RFLP): i primi marcatori genotipici scoperti. Diagnosi genotipica diretta e attraverso l'analisi del legame con marcatori polimorfi. Uso di oligonucleotidi sintetici e della PCR. PCR multiplex e nested PCR.


- Diagnosi molecolare di alcune malattie costituzionali. Il modello delle malattie dell'emoglobina. Patologia molecolare dei geni del cromosoma X: Emofilia A; Distrofia muscolare di Duchenne; La sindrome X-Fragile.


- Diagnosi prenatale. Materiali biologici (sangue fetale, liquido amniotico, villi coriali, colture cellulari). Diagnosi prenatale di patologie congenite: Anomalie cromosomiche; Talassemie; Difetti del tubo neurale.


- Le possibilità offerte dalla diagnosi genotipica degli agenti infettanti.


- DNA e medicina legale. La carta di identità genotipica.


- Le patologie mitocondriali. Il DNA mitocondriale e le sue mutazioni. Eteroplasmia. Alterazioni del metabolismo ossidativo mitocondriale. Le encefalomiopatie mitocondriali: caratteristiche cliniche e biochimiche. Ereditarietà. Possibilità diagnostiche.
-Analisi di livelli di espressione proteica e applicazioni biomediche. Il proteoma di alcuni tessuti e fluidi biologici.
 
Testi consigliati e bibliografia
-R.L. Nussbaum, R.R. McInnes, H.F. Willard, THOMPSON & THOMPSON GENETICA IN MEDICINA. Casa Editrice Idelson-Gnocchi, Napoli
- K. Wilson, J. Walker, BIOCHIMICA E BIOLOGIA MOLECOLARE. PRINCIPI E TECNICHE. Raffaello Cortina Editore.
- J.C. Kaplan, M. Delpech, BIOLOGIA MOLECOLARE E MEDICINA. Casa Editrice Idelson-Gnocchi, Napoli.
 
Altre informazioni
http://bbcd.bio.uniroma1.it/bbcd/